紫外分光光度法测定啤酒中的双乙酰

1原理

双乙酰作为挥发性组份从啤酒样中蒸发出来，与邻苯二胺反应，生成2，3－二甲喹喔啉，在335nm波长下进行测定。由于其他联二酮类都具有相同的反应特性，再加上蒸馏过程中部分前驱体要转化成联二酮，因此上述测定结果为总联二酮含量(以双乙酰表示)。

2 仪器

带有加热套管的双乙酰蒸馏器 ；

具有锥形瓶(或平底蒸馏烧瓶)的蒸汽发生瓶：2000mL(或3000mL) ；

容量瓶：25 mL ；

美析UV-1100或UV-1200紫外分光光度计：备有10mm石英比色皿或20mm玻璃比色皿。

3 试剂和溶液

4mol/L盐酸溶液：按GB/T 601配制；

l0g/L邻苯二胺溶液：称取邻苯二胺0.100g，溶于4mol/L盐酸溶液中，并定容至10mL，摇匀，放于暗处。此溶液须当天配制与使用；若配制出来的溶液呈红色，应重新更换新试剂；

有机硅消泡剂(或甘油聚醚) 。

4 分析步骤

4.1  蒸馏

  将双乙酰蒸馏器安装好，加热蒸汽发生瓶，使水至沸。通汽预热后，置25mL容量瓶于冷凝器出口接受馏出液，外加冰浴冷却，加2～4滴消泡剂于100mL量筒中，再注入未经除气的预先冷至5℃左右的酒样100mL，迅速移入已预热的蒸馏器内，并用少量水冲洗带塞漏斗，盖塞。然后用水封口，进行蒸馏，直至馏出液接近25mL(蒸馏需在3～5min内完成)时取下容量瓶，达到室温用水定容，摇匀。

4.2  显色与测量：

分别吸取馏出液10.0mL于两支干燥的比色管中，并于第一支管中加入邻苯二胺溶液0.50mL，第二支管中不加(做空白)，充分摇匀后，同时置于暗处放置20～30min，然后于第一支管中加4mol/L盐酸溶液2mL，于第二支管中加入4mol/L盐酸溶液2.5mL，混匀后，于335nm波长下，用20mm玻璃比色皿，以空白调仪器零点，测定其吸光度。比色测定操作须在20min内完成。

5分析结果的表述

  试样中双乙酰含量按式(2)计算：

X ＝A335*1.2……………………………………………………………

式中：   X —— 试样中双乙酰的含量，mg/L ；

  A335—— 试样在335nm波长下，用20mm比色皿测得的吸光度；

   1.2—— 吸光度与双乙酰含量的换算系数。